文献类型： 中文期刊
作者： 王琳 1 ; 梁旭方 2 ; 李光照 2 ; 刘秀霞 2 ; 林群 2 ; 白俊杰 2 ;
作者机构： 1.暨南大学生命科学技术学院
2.暨南大学生命科学技术学院;中国水产科学研究院珠江水产研究所
关键词： 鳜;解偶联蛋白;基因克隆;序列分析;组织表达
期刊名称： 水产学报
ISSN： 1000-0615
年卷期： 2009 年 33 卷 06 期
页码： 22-34
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 从分子水平上探讨了鳜解偶联蛋白1、2(UCP1,2)基因结构、组织表达水平及与产热、脂肪代谢等生理机能的关系。通过与脊椎动物UCP1、UCP2基因序列进行比对,设计简并引物与特异引物进行PCR和RACE扩增、测序、拼接序列,获得UCP1、UCP2的基因组序列和内含子/外显子结构。基因组步行法克隆鳜肝脏UCP1、UCP2基因5′侧翼序列。应用半定量RT-PCR的方法,以β-肌动蛋白作为外参照,在其指数期增长的范围内得到鳜不同组织UCP1、UCP2的相对表达水平。结果表明,UCP1基因组全序列为3146bp,5′侧翼调控区为1333bp,含有5个内含子和6个外显子,开放阅读框(ORF)长942bp,编码一个大小为313个氨基酸的蛋白质。UCP2基因组全序列为2890bp,5′侧翼调控区为1800bp,含有7个内含子和8个外显子,ORF长939bp,编码一个大小为312个氨基酸的蛋白质。UCP1、UCP2间隔外显子的内含子皆符合"GT-AG"规则,内含子的数目与哺乳动物一致。系统进化分析表明,鳜UCP1、UCP2氨基酸序列分别与鱼类UCP1、UCP2氨基酸序列聚为一支,且与UCP3、UCP4、UCP5分支区分明显。鳜UCP1、UCP2基因不同组织表达水平的高低可能与鳜本身的生态习性及各器官在产热、脂质代谢中的作用相关,但明确的分子机制尚待进一步研究。
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