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非洲猪瘟病毒锁核酸探针荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 李艳 1 ; 郭怡德 1 ; 勾红潮 1 ; 卞志标 1 ; 孙铭飞 1 ; 蔡汝健 1 ; 宋帅 1 ; 蒋智勇 1 ; 楚品品 1 ; 徐民生 1 ; 杨东霞 1 ; 李春玲 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院动物卫生研究所

关键词: 非洲猪瘟病毒;P72基因;LNA-TaqMan探针荧光定量PCR

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2021 年 41 卷 002 期

页码: 208-212,230

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)P72基因核苷酸序列设计特异性引物和锁核酸(locked nucleic acid,LNA)-TaqMan探针,建立了基于P72基因的LNA-TaqMan探针的ASFV荧光定量PCR方法.结果显示,所建立的LNA-TaqMan探针荧光定量PCR方法具有较高的灵敏度,最低检测限为3.9拷贝/μL,且与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪圆环病毒2型等多种病原不存在交叉反应;该方法的重复性良好,批内和批间变异系数均小于1%;56份临床样品的检测结果与O1E推荐的qPCR方法检测结果一致,符合率为100%.结果表明,本试验所建立的ASFV LNA-TaqMan探针荧光定量PCR方法敏感性、特异性和重复性良好,为ASFV检测提供了一种新的技术选择.

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