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鲤mstn基因RNA干涉载体构建与检测分析

文献类型: 中文期刊

作者: 闫学春 1 ; 栾培贤 1 ; 何立川 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所淡水鱼类育种国家地方联合工程实验室淡水水产生物技术与遗传育种重点实验室

关键词: 鲤;MSTN;干涉载体;检测

期刊名称: 水产学杂志

ISSN: 1005-3832

年卷期: 2021 年 005 期

页码: 22-27

摘要: 肌肉生长抑制素(Myostation,MSTN)是影响肌肉生长的负调控因子,其缺失或突变会导致肌肉量的增加。本研究参照鲤(Cyprinus carpio)高通量转录组测序数据的拼接结果,筛选出针对mstn基因的si RNA序列(19bp保守同源序列),合成si RNA转录模板的发夹结构,构建包含斑马鱼(Danio rerio)U6启动子、干涉片段si MSTN和鲤mstn的供体质粒pzu6p-si MSTN。通过显微注射方法,获得一批转鲤mstn基因的转基因鲤。经PCR检测,转基因鲤mstn外源基因的平均整合率为36.2%,对其中5尾转基因阳性鲤的扩增产物进行回收、克隆和测序验证。结果表明:转基因阳性鲤中均含有转基因目的片段,说明鲤mstn基因RNA干涉载体可在鲤中实现基因整合,为进一步获得具有特殊功能的转基因鱼类提供新的方法。

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