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俄罗斯鲟β-防御素基因的克隆及表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 白莉 1 ; 陈亚东 2 ; 夏永涛 2 ; 许式见 2 ; 胡谋 2 ; 沙珍霞 3 ;

作者机构: 1.大连海洋大学水产与生命学院;农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;青岛大学生命科学学院;杭州千岛湖鲟龙科技股份有限公司

2.;大连海洋大学水产与生命学院;农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;青岛大学生命科学学院;杭州千岛湖鲟龙科技股份有限公司

3.;大连海洋大学水产与生命学院;农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;青岛大学生命科学学院;杭州千岛湖鲟龙科技股份有限公司;

关键词: 俄罗斯鲟;β-防御素;基因克隆;基因表达;嗜水气单胞菌

期刊名称: 渔业科学进展

ISSN: 2095-9869

年卷期: 2018 年 05 期

页码: 20-26

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: β-防御素是一类富含半胱氨酸的阳离子抗菌肽,在脊椎动物免疫系统中发挥重要作用。本研究基于转录组Solexa测序结果,利用PCR和荧光定量PCR技术对俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti)β-防御素基因进行了克隆和表达模式分析。结果显示,俄罗斯鲟β-防御素c DNA片段长度为333 bp,包含开放阅读框(Open reading frame,ORF)213 bp,推测编码71个氨基酸;SMART分析显示,该基因包含23个氨基酸的信号肽、1个防御素-β-2结构域和6个保守的半胱氨酸残基,此结构与其他物种极为相似,在进化中比较保守。同源比对发现,俄罗斯鲟β-防御素与鱼类的相似度最高,为54%~60%。β-防御素基因在健康俄罗斯鲟11种组织(肝、肠、脾、头肾、胃、鳃、血液、脑、皮肤、肌肉和性腺)中均有表达,其中,在性腺和皮肤中表达量最高;病原菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染后可强烈影响β-防御素基因在6种免疫组织(肝、肠、脾、头肾、血液和鳃)中的时空表达。其中,在头肾中的上调表达最明显,在感染后72 h为表达峰值,达到0 h表达量的700倍。在脾、血液和肠中均有几倍至十几倍的上调,而在肝中整体呈现下调表达趋势。研究表明,β-防御素基因参与了俄罗斯鲟的免疫应答过程,本结果为俄罗斯鲟的免疫调控和病害防治研究奠定了基础。

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