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表达禽流感HA基因的重组马立克氏病病毒的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 周雪媚 1 ; 霍惠玲 2 ; 佘锐萍 1 ; 李永清 3 ; 冯国民 4 ; 章振华 3 ; 王宏俊 3 ;

作者机构: 1.中国农业大学动物医学院

2.河北省兽药监察所

3.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

4.江西农业大学动物医学院

关键词: 禽流感病毒;HA基因;重组马立克氏病病毒

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2007 年 22 卷 04 期

页码: 168-171

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本试验首先用RT-PCR方法扩增出H9N2亚型禽流感病的HA基因,大小约1 700 bp,将其克隆到真核表达载体pcDNA中,并将该真核表达载体上的CMV启动子控制的含LacZ和HA基因表达盒克隆入马立克氏病病毒US2基因中,成功的构建了马立克氏病病毒的转移载体。然后,通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,通过蓝斑筛选获得重组病毒。该重组病毒通过PCR方法鉴定证实其基因组中含有完整的HA基因。免疫酶反应和Western-blot证实重组病毒表达了禽流感HA蛋白,表达的HA蛋白具有血凝活性。

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