文献类型： 中文期刊

作者： 乔玉山 ¹ ; 宋长年 ¹ ; 渠慎春 ¹ ; 胡钟东 ¹ ; 熊爱生 ² ; 姚泉洪 ² ; 章镇 ¹ ;

作者机构： 1.南京农业大学园艺学院

2.上海市农业科学院生物技术研究所

关键词： 砂梨;ACC氧化酶;cDNA;克隆;反义表达载体

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2008 年 06 期

页码： 799-804

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用RT-PCR和RACE技术从‘早生新水’砂梨成熟果实cDNA中克隆出ACC氧化酶基因保守片段及其5′和3′端,拼接后获得砂梨果实ACC氧化酶cDNA全长。该cDNA全长1225bp,将其命名为Pyp-ACO,GenBank登录号为EF451060。Pyp-ACO核苷酸序列有一个945bp的开放读码框,5′端非翻译区为63bp,3′端非翻译区为217bp,与西洋梨和苹果的编码区核苷酸序列有较高的同源性,分别为98.3%和98.1%。Pyp-ACO推导编码314个氨基酸,该序列具备非血红素二价铁离子依赖型的氧化/加氧酶类的12个保守氨基酸和催化活性所需的3个氨基酸。将Pyp-ACO编码区序列反向插入pYPX145载体,构建了由双35S启动子所控制的双元表达载体,同时已成功将表达载体导入根癌农杆菌菌株LBA4404,为耐贮藏转基因梨选育奠定了基础。