文献类型： 中文期刊
作者： 刘清 1 ; 孙谧 2 ;
作者机构： 1.青岛科技大学化工学院
2.中国水产科学研究院黄海水产研究所
关键词： GABAB受体;蛋白表达;大肠杆菌;蛋白纯化;复性
期刊名称： 青岛科技大学学报(自然科学版)
ISSN： 1672-6987
年卷期： 2008 年 02 期
页码： 114-117
摘要： 在大肠杆菌中培养含有pET28c质粒的BL(DE3),1 mmol.L-1IPTG诱导表达,收集包涵体蛋白,对其进行初步洗涤纯化,然后用8 mol.L-1尿素溶解,在变性条件下(8 mol.L-1尿素)经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱进行亲和层析纯化,得到的电泳纯的蛋白,纯度可达95%以上。采用柱上复性的方法对包涵体蛋白进行复性,依次以含有6,5,4,3,2,1,0 mol.L-1尿素的Refolding buffer缓冲液洗柱,此方法可实现蛋白的同时纯化及复性。
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