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新型鸭呼肠孤病毒RT-PCR方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 王劭 1 ; 陈少莺 1 ; 陈仕龙 1 ; 程晓霞 1 ; 林锋强 1 ; 朱小丽 1 ; 江斌 1 ; 李兆龙 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 新型鸭呼肠孤病毒;RT-PCR;检测

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2011 年 19 卷 02 期

页码: 388-392

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 研究建立检测新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)的RT-PCR方法,并运用建立的检测方法对分离毒与人工感染样品进行应用检测。根据NDRV-NP03株S3基因全序列(NDRV-NP03,GenBank登录号:GQ888710),设计合成了一对引物,以NDRV分离株为模板,建立了检测NDRV的RT-PCR方法。结果显示:该方法仅能从NDRV分离毒中扩增到与预期大小相符长度为586bp的特异性目的片段,检测灵敏度达到2pg病毒RNA,而其它病毒,番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)、禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)、鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)、番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)、鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)、鸭副粘病毒(Duck paramyxovirus,DPMV)、鸭病毒性肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)等样品的扩增结果均为阴性。应用该方法对8株NDRV分离毒和3份人工感染鸭肝脾组织进行检测均为阳性。表明建立的RT-PCR方法特异性强、敏感度高,可用于NDRV的临床诊断和流行病学调查。

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