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基于荧光定量PCR的鳜传染性脾肾坏死病毒滴度检测方法

文献类型： 中文期刊

作者： 付小哲 1 ; 李宁求 1 ; 林强 1 ; 石存斌 1 ; 吴淑勤 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所

关键词： 鳜;传染性脾肾坏死病毒;疫苗;滴度;定量PCR

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2014 年 38 卷 09 期

页码： 1573-1578

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的ORF007基因,设计特异性引物及TaqMan探针,建立了ISKNV的实时荧光定量PCR方法。采用CPE法对连续10倍稀释的ISKNV培养液的滴度进行了测定,同时采用荧光定量PCR法测定病毒拷贝数。结果显示,荧光定量PCR测定的病毒拷贝数与CPE法测定的病毒滴度具有良好的线性关系,其线性方程为y=1.076x+0.545(R2=0.998 6),其中y为基因组拷贝数浓度的对数,x为病毒滴度TCID50的对数。研究表明,荧光定量PCR法可替代CPE法应用于ISKNV疫苗抗原的定量,大大缩短了疫苗制备的时间,为疫苗生产提供了方便。

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