文献类型： 中文期刊
作者： 张传健 1 ; 许梦微 1 ; 王志胜 1 ; 侯继波 1 ; 王继春 1 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院/国家兽用生物制品工程技术研究中心
关键词： 鸭瘟;鸡胚化弱毒株;细菌人工染色体;糖蛋白质C
期刊名称： 江苏农业学报
ISSN： 1000-4440
年卷期： 2014 年 05 期
页码： 1064-1070
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了构建鸭瘟鸡胚化弱毒株DEV(atten)的细菌人工染色体(BAC),将转移载体质粒pDEVgC-pHA2DNA和DEV(atten)DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行重组,通过三轮挑斑纯化,以获得纯化的鸭瘟重组病毒。将纯化的鸭瘟重组病毒的DNA电转化到E.Coli DH10B中,对获得的克隆用酶切、PCR方法进行鉴定并测序。提取阳性克隆的DNA转染CEF,以拯救重组病毒。再通过将带有相同同源臂和UL44(糖蛋白质C,gC)基因的片段和阳性克隆的DNA共转染鸡胚成纤维细胞进行重组,以获得gC恢复病毒。采用0.01感染复数(MOI)感染CEF对亲本病毒、恢复病毒进行多步法生长曲线测定,比较其有无差异。结果显示:成功获得了DEV的mini-F重组病毒,命名为DEV(atten)-mini-F,获得2个阳性克隆S1、S2,将S1命名为pDEV(atten),应用pDEV(atten)拯救重组病毒获得gC恢复病毒DEV(atten)ΔgC-R,生长特性的结果显示亲本病毒与恢复病毒间无显著性差异。表明成功构建的DEV(atten)的细菌人工染色体为全基因组的感染性克隆。
- 相关文献
[1]伪狂犬病病毒变异株US3基因失活株的构建与生物学特性分析. 吕家轩,张传健,侯继波,费荣梅,王继春. 2020
[2]表达禽流感病毒H5亚型基因重组鸭瘟病毒的构建. 许梦微,王志胜,乔永峰,顾一奇,柳畅,侯继波,姜平,王继春. 2015
[3]一种新型火鸡疱疹病毒细菌人工染色体的构建与鉴定. 王志胜,刘芳,许梦微,乔永峰,侯继波,王继春. 2016
[4]表达猪流行性腹泻病毒变异株S基因重组伪狂犬病病毒的构建与鉴定. 张传健,郭仕琦,郭容利,刘晓琳,陈赛赛,王志胜,曾容愚,咼荣兵,王继春. 2023
[5]猪源伪狂犬病病毒变异株AH02LA株细菌人工染色体的构建与鉴定. 刘娅梅,乔永峰,顾一奇,柳畅,许梦微,王志胜,郭容利,张传建,侯继波,王继春. 2018
[6]伪狂犬病病毒变异株UL43和UL56基因失活株的构建与生物学特性分析. 吕家轩,张传健,王志胜,何青,王继春,费荣梅. 2022
[7]猪源伪狂犬病病毒变异株AH02LA株细菌人工染色体的构建与鉴定. 刘娅梅,乔永峰,顾一奇,柳畅,许梦微,王志胜,郭容利,张传建,侯继波,王继春. 2018
作者其他论文 更多>>
-
新城疫病毒La Sota株热损伤靶点的初步分析
作者：曾敏倩;焦嘉杰;左晓昕;王军宁;赵艳红;冯磊;卢宇;吕芳;周斌;侯继波
关键词：新城疫病毒;La Sota株;热损伤靶点;吸附;内化;纤突蛋白;核衣壳
-
刀豆蛋白A及其与糖基的相互作用和应用
作者：李兰;程海卫;张元鹏;侯继波;陈瑾;郑其升
关键词：刀豆蛋白A;凝集素;囊膜病毒;糖蛋白;纯化;生物诊断
-
CVC1302通过小鼠骨髓源树突状细胞对免疫反应的调控
作者：侯立婷;于晓明;杜露平;张元鹏;程海卫;陈瑾;郑其升;侯继波
关键词：C57BL/6小鼠;树突状细胞;CVC1302;抗原递呈;T淋巴细胞活化
-
表达猪流行性腹泻病毒变异株S基因重组伪狂犬病病毒的构建与鉴定
作者：张传健;郭仕琦;郭容利;刘晓琳;陈赛赛;王志胜;曾容愚;咼荣兵;王继春
关键词：伪狂犬病病毒;猪流行性腹泻病毒;重组病毒;S基因;细菌人工染色体
-
伪狂犬病病毒TK、gE双基因缺失传代致弱株的安全性及免疫效力研究
作者：朱来旭;许梦微;张传健;郭容利;王志胜;陈赛赛;费荣梅;王继春
关键词：伪狂犬病病毒;基因缺失;传代致弱;安全性;免疫效力
-
刀豆蛋白A纯化猪流行性腹泻病毒的研究
作者：李兰;张浩明;杨利;程海卫;侯立婷;张元鹏;侯继波;陈瑾;郑其升
关键词：刀豆蛋白A;猪流行性腹泻病毒;纯化
-
应用荧光定量PCR方法检测伪狂犬病病毒弱毒株在猪体组织中的分布
作者：许梦微;朱来旭;陈赛赛;张传健;王志胜;郑亚婷;刘娅梅;童玲;曹瑞兵;王继春
关键词：伪狂犬病病毒;TK/PK/gE三基因缺失弱毒株;荧光定量PCR;组织分布
