文献类型： 中文期刊

作者： 季艳 ¹ ; 周旋 ² ; 于永耀 ³ ; 刘晓丹 ⁴ ; 张驰 ⁵ ; 林强 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所

2.武汉海关技术中心

3.华中农业大学水产学院

4.扬州大学动物科学与技术学院

5.武汉轻工大学动物科学与营养工程学院

关键词： MiR-130c-5p;乌鳢水泡病毒（SHVV）;靶向;G蛋白;弹状病毒

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2024 年 005 期

页码： 15-25

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究miR-130c-5p在乌鳢水泡病毒（snakehead vesiculovirus, SHVV）感染中潜在靶基因g的靶向关系以及对病毒复制的影响，本研究以斑点叉尾鮰卵巢（channel catfish ovary, CCO）为实验材料，通过实时荧光定量PCR （quantitative real-time PCR, qRT-PCR）和免疫印迹（Western blot）技术测定SHVV不同感染时间和感染剂量条件下，病毒基因水平和蛋白水平以及miR-130c-5p变化情况。此外，将SHVV的g基因上miR-130c-5p对应的靶序列克隆到质粒pmirGLO，构建质粒pmirGLO-G用于双荧光素酶报告实验进行靶基因验证。结果显示，随着SHVV感染时间及剂量的不断增加，miR-130c-5p和g基因的表达水平都显著上调。进一步实验证明，miR-130c-5p类似物和pmirGLO-G质粒共转染可显著抑制荧光素酶活性强度，而转染miR-130c-5p抑制剂则明显上调了pmirGLO-G报告载体的荧光信号。此外，miR-130c-5p的过表达显著降低了病毒g基因的mRNA及蛋白表达，而抑制miR-130c-5p的表达则上调了g基因的mRNA及蛋白的表达水平。研究结果表明，miR-130c-5p通过靶向SHVV的g基因，引起G蛋白的降解，从而抑制SHVV的增殖。本研究结果为理解microRNA调控SHVV的致病机制提供了重要基础，为抗SHVV疫苗等药物的研发提供了理论支持。