文献类型: 中文期刊
作者: 温立斌 1 ; 何孔旺 1 ; 杨汉春 2 ; 倪艳秀 1 ; 张雪寒 1 ; 郭容利 1 ; 潘群兴 1 ;
作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所
2.中国农业大学动物医学院
关键词: P2因子;猪圆环病毒;分子克隆;PK-15细胞
期刊名称: 中国科学(C辑:生命科学)
ISSN: 1006-9259
年卷期: 2008 年 05 期
页码: 34-39
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 在中国猪血清中分离到一新因子,命名为P2.P2为闭合环状基因组,全长993个核苷酸.序列分析表明其与猪圆环病毒密切相关.随后对构建的P2因子分子克隆的体外感染性进行了研究.结果表明,在转染PK-15细胞后,只有P2因子的双拷贝串联分子克隆具有感染性,表现为可在细胞的胞浆和胞核中形成包涵体,胞浆包涵体为圆形或不规则形,直径0.1~0.4μm;胞核包涵体有两种类型,一种为小而圆、直径约0.1μm的包涵体,另一种为大而呈六角性的包涵体,直径约为0.5~1.4μm胞浆包涵体和胞核包涵体都没有外膜,相比较而言,后者有更高的电子密度.将转染后的细胞连续传代,对第5代细胞培养物抽提DNA,进行PCR,结果也只有在转染P2因子双拷贝串联分子克隆的细胞培养物中检测到P2的DNA.而转染空载体、P2因子单分子克隆和未转染的PK-15细胞微观结构未见变化,在第5代细胞培养物中也未能检测到P2的DNA.同样,只有在转染P2因子双拷贝串联分子克隆的细胞和随后传代的细胞中能检测到P2抗原.这是首次报道如此小基因组的类猪圆环病毒P2的全序列和其在体外具有感染性.
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