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茉莉花实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证

文献类型： 中文期刊

作者： 齐香玉 1 ; 陈双双 1 ; 冯景 1 ; 王华娣 2 ; 邓衍明 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院休闲农业研究所江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室

2.江苏大学生命科学学院

关键词： 茉莉花;qRT-PCR;内参基因;表达稳定性

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2020 年 006 期

页码： 22-30

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为筛选适合茉莉花的内参基因,以5种组织（根、茎、嫩叶、成熟叶、花）和4个发育阶段的花（幼蕾期、膨大花蕾期、最长花蕾期和初绽期）为试验材料,选择较常见的8个候选内参基因进行引物特异性分析,结果显示,8个内参基因均扩增出单一条带,溶解曲线均只有明显的单一峰。采用qRT-PCR技术分析8个内参基因在不同样品中的表达量,结果显示,内参基因在不同样品中的表达量存在差异,各基因在花中的表达量均显著低于其他样品。利用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件对基因的表达稳定性进行评价,并通过RefFinder对表达稳定性进行综合分析,结果表明,适用于不同组织（有花组）的最优内参基因为SAND和UPL7;适用于不同组织（无花组）的最优内参基因为UPL7和GAPDH;而适宜不同发育阶段花的最优内参基因为Actin和EF1α。进一步利用JsDXS和JsPAL2对筛选的内参基因进行验证,结果显示,以稳定性好的Actin、EF1α及Actin+EF1α组合为参照时,JsDXS和JsPAL2在花发育不同阶段的表达水平的变化趋势基本一致,而用最不稳定的PP2A为参照时,花发育不同阶段的表达水平的变化趋势不一致。总之,本研究对茉莉花内参基因进行了筛选,不同组织（有花组）的最优内参基因为SAND和UPL7;不同组织（无花组）的最优内参基因为UPL7和GAPDH;花发育不同阶段的最优内参基因为Actin和EF1α。

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