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G418抗性基因nptⅡ双元载体的构建及谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化

文献类型: 中文期刊

作者: 曹旸 1 ; 刘永翔 2 ; 谭玉梅 3 ; 王海 1 ; 刘作易 1 ;

作者机构: 1.华中农业大学生命科学技术学院

2.贵州省农科院生物技术研究所

3.贵州省农业生物技术重点实验室

关键词: G418抗性;双元载体;谢瓦氏曲霉间型变种;遗传转化

期刊名称: 西南农业学报

ISSN: 1001-4829

年卷期: 2013 年 26 卷 06 期

页码: 2509-2513

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为给谢瓦氏曲霉间型变种(Aspergillus chevalieri var.intermedius)多基因功能的研究提供新的选择标记,利用MYA培养基测G418敏感性后,以质粒pcDNA3.1(+)为中间载体构建nptⅡ基因表达元件,利用根癌农杆菌介导法转化至谢瓦氏曲霉间型变种。结果表明:用构巢曲霉PgpdA启动子、nptⅡ基因和构巢曲霉色氨酸C终止子TtrpC组成的G418抗性基因盒替换双元载体pDHt/sk-bar上的草丁膦抗性盒,成功构建双元载体pDHt/sknt,并且通过根癌农杆菌介导的转化获得的G418抗性转化子遗传稳定,nptⅡ基因主要以单拷贝形式插入谢瓦氏曲霉间型变种基因组DNA中。因此,双元载体pDHt/sknt适用于谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化。

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