文献类型： 中文期刊
作者： 赵银丽 1 ; 王建华 2 ; 王自良 3 ; 滕蔓 4 ; 刘庆堂 5 ;
作者机构： 1.河南工业大学生物工程学院
2.西北农林科技大学动物科技学院
3.河南科技学院动物科学学院
4.河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室
5.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室
关键词： 恩诺沙星;杂交瘤细胞;竞争ELISA试剂盒
期刊名称： 核农学报
ISSN： 1000-8551
年卷期： 2008 年 22 卷 06 期
页码： 160-165
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 利用合成的完全抗原(BSA-ENR)免疫小鼠,通过细胞融合技术和间接竞争ELISA筛选出了能分泌恩诺沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以此为基础研制恩诺沙星残留检测的竞争ELISA试剂盒(competitive ELISA ENR-Kit),并测定其性能。结果表明:筛选出的2株杂交瘤细胞,单抗亚类均为IgG1型,其中4G1-B3株的ENR mAb间接ELISA效价为1:1.024×106,亲和常数(Ka)为9×1010L/mol;竞争ELISA试剂盒的线性检测范围为0.05~101.6μg/L、灵敏度0.05μg/L、半数抑制浓度(IC50)1.1μg/L,与其他化合物的交叉反应率(CR%)均小于0.01%,鸡肉样、鸡肝样、鱼肉样和牛奶样的平均添加回收率分别为81.5%8、7.6%、84.3%和95%,不同基质添加恩诺沙星标准品做竞争ELISA对ENR-Kit检测结果影响小,试剂盒保存期6个月以上。结果说明该竞争ELISA试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点,适用于ENR残留的快速检测。
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