文献类型： 中文期刊
作者： 王伟东 1 ; 滕蔓 1 ; 郑鹿平 1 ; 刘金玲 1 ; 张文凯 1 ; 李林燕 1 ; 张志会 1 ; 樊剑鸣 2 ; 罗俊 1 ;
作者机构： 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业农村部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室
2.郑州大学公共卫生学院
关键词： 马立克病;miR-M11;微小RNA;CRISPR/Cas9;基因编辑;qPCR;复制
期刊名称： 河南农业科学
ISSN： 1004-3268
年卷期： 2023 年 001 期
页码： 134-143
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒（MDV）体外复制能力的影响，以MDV国内分离株HN302为研究对象，利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miRM11，构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN302ΔM11（克隆号C58-8-4）。经过PCR鉴定、测序分析、间接免疫荧光试验（IFA）、实时荧光定量PCR（qPCR）以及传代稳定性分析，证实HN302编码的miRM11被精确编辑并从病毒基因组中完全缺失，且未发生回复突变。病毒增殖曲线绘制结果显示，miRM11缺失毒株HN302ΔM11的增殖速度显著高于亲本毒株HN302（P＜0.05）。综上，miR-M11是MDV复制的非必需基因，且其缺失后可增强MDV的体外复制能力。
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