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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌APX Ⅱ基因特异片段的克隆和表达

文献类型： 中文期刊

作者： 袁秀芳 1 ; 王一成 1 ; 徐丽华 1 ; 张存 1 ; 叶伟成 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌;克隆;表达;Westernblotting

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2007 年 19 卷 01 期

页码： 6-10

收录情况： CSCD

摘要： 将猪传染性胸膜肺炎放线杆菌APXⅡ的一段毒素基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET-APXⅡ,并将其转化到受体菌BL21中,诱导剂IPTG进行诱导表达,4 h后达到高峰。经12%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白大小约为31 kD。经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应,说明该表达蛋白具有免疫原性,这为下一步用此表达蛋白作为抗原,对APP进行诊断试剂的研制和基因工程疫苗的研究提供科学依据。

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