文献类型： 中文期刊
作者： 王耘 1 ; 武爱华 2 ; 张存政 2 ; 刘贤金 3 ;
作者机构： 1.金陵科技学院园艺学院;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室
2.;金陵科技学院园艺学院;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室
3.;金陵科技学院园艺学院;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室;
关键词： Cry2Aa毒素;单链抗体;时间分辨荧光免疫分析;同源模建;分子对接
期刊名称： 现代食品科技
ISSN： 1673-9078
年卷期： 2017 年 06 期
页码： 309-312+292
收录情况： 北大核心
摘要： Cry2Aa毒素是一种新型生物农药,分析该毒素与特异性单链抗体分子互作,并建立快速检测毒素残留的方法对保障食品和生态安全有重要意义。本研究以同源蛋白为模板对单链抗体进行建模,并进行了Cry2Aa毒素与单链抗体的分子对接模拟,确定关键结合位点,以此为基础将单链抗体作为检测抗体,建立了间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法,对大米样品中Cry2Aa毒素进行了检测。利用生物信息学工具模拟获得单链抗体三维结构模型,分子对接结果显示重链可变区81NY82和121SGNY124区域及轻链可变区的245YSSN248氨基酸残基在与毒素结构Ⅱ区识别过程中起关键作用,为建立高效检测方法奠定基础,进一步基于该单链抗体建立的时间分辨检测方法灵敏度(IC10)为0.08 ng/m L,中抑制浓度(IC50)为7.99 ng/m L,线性检测范围(IC20~IC80)为0.24~263.77 ng/m L,且与常规双抗夹心ELISA法检测呈良好线性关系。
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