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甘薯潜隐病毒外壳蛋白基因的克隆、表达及其抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 黄玉娜 1 ; 张振臣 1 ;

作者机构： 1.河南省农业科学院植物保护研究所

关键词： 甘薯潜隐病毒;外壳蛋白基因;序列分析;原核表达;抗血清

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2007 年 37 卷 03 期

页码： 255-259

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据已报道的甘薯潜隐病毒(Sweet potato latent virus,SPLV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,利用RT-PCR方法克隆了SPLV河南分离物(SPLV-HN)的CP基因及部分3′端非编码区序列,序列分析表明,SPLV-HN CP基因由879个核苷酸组成(GenBank登录号为DQ399862),编码293个氨基酸残基。与GenBank中SPLV-CH(X84011)和SPLV-T(X84012)分离物的核苷酸序列相似性分别为96.8%和93.0%;与日本分离物(E15420)的核苷酸序列相似性为83.6%。将CP基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPLV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甘薯样品的检测。

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