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草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白功能及免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 王杭军 1 ; 叶星 1 ; 田园园 1 ; 张莉莉 1 ; 邓国成 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所

关键词： 草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株;重组VP5蛋白;核苷三磷酸酶;活性;免疫原性

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2013 年 37 卷 01 期

页码： 109-116

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 在前期研究中分离到一株草鱼呼肠孤病毒,GCRV-GD108,并获得其全基因组序列。该病毒株的M5基因编码VP5蛋白,该蛋白与哺乳动物正呼肠孤病毒μ2蛋白具有较高的同源性及相似的NTPase结合保守区域,推测VP5蛋白也同样具有NTPase活性。为检测VP5蛋白是否具有NTPase活性及其是否具有免疫保护作用,采用已构建的原核表达载体表达VP5重组蛋白,通过孔雀绿钼酸铵法检测纯化后的重组蛋白的NTPase活性。采用DNAstar软件预测M5基因编码蛋白的抗原性,综合蛋白亲水性、表面可及性与表面抗原性三项指标,预测编码蛋白可形成抗原表位的氨基酸区域数多达86个,提示VP5蛋白具有较强的免疫原性。用重组蛋白VP5免疫健康草鱼,通过人工攻毒实验检测VP5蛋白的免疫保护作用。结果显示,VP5重组蛋白具有NTPase活性,且其NTPase活性依赖于Mg2+或Na+/K+,而Ca2+的存在可能抑制其活性;VP5蛋白可诱导草鱼产生高水平的抗体滴度,并显著提高IgM mRNA的表达水平,但未能为草鱼提供抗GCRV感染的保护。研究首次证实GCRV-GD108株VP5蛋白具有NTPase活性,但不能为草鱼提供免疫保护作用。

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