文献类型： 中文期刊
作者： 黎炯 1 ; 叶星 1 ; 可小丽 1 ; 卢迈新 1 ; 迟妍妍 1 ; 田园园 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所
关键词： 罗非鱼;无乳链球菌;表面免疫原性蛋白;原核表达;免疫原性;抗体;相对保护率
期刊名称： 水生生物学报
ISSN： 1000-3207
年卷期： 2012 年 36 卷 04 期
页码： 626-633
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 表面免疫原性蛋白(Surface Immunogenic Protein,Sip)是B群链球菌(Group B Streptococcus,GBS)的一种表面蛋白,在GBS多种血清型的菌株中均有表达。研究从实验室分离到的罗非鱼无乳链球菌广东株的基因组DNA中扩增出Sip基因,构建原核表达载体pColdII-Sip,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)菌株。经诱导表达、SDS-PAGE电泳检测显示重组蛋白主要以可溶形式表达。重组蛋白用亲和层析的方法纯化,蛋白纯度达98%。纯化后的重组蛋白免疫罗非鱼(Oreochromis niloticus,GIFT strain)以分析其免疫原性。受免鱼免疫14d后进行人工攻毒试验,免疫组的相对保护率为70%—87%。酶联免疫吸附试验(Elisa)显示受免鱼对重组蛋白产生了较好的免疫应答,免疫剂量为3μg/g和5μg/g时受免鱼血清抗体滴度可达1:128000。研究结果显示重组蛋白Sip具有较强的免疫原性和保护作用,Sip基因可作为罗非鱼链球菌基因工程亚单位疫苗候选基因。
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