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甘薯病毒G(SPVG)外壳蛋白基因的克隆、表达及其抗血清的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 付振艳 1 ; 张振臣 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院植物保护研究所

关键词: 甘薯病毒G;外壳蛋白基因;序列分析;原核表达;抗血清

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2007 年 23 卷 01 期

页码: 38-41

摘要: 根据已报道的甘薯病毒G(SweetPotatoVirusG,SPVG)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,利用RT-PCR方法克隆了SPVG河南分离物(SPVG-HN)的CP基因,序列分析表明,SPVG-HNCP基因由1065个核苷酸组成(GenBank登录号为DQ399861),编码355个氨基酸残基。与GenBank中Egypt1(AJ515380)、LSU-1(AY178991)和LSU-3(AY178990)分离物的核苷酸序列相似性为98%左右,与中国广东分离物SPVG-CH(X76944)和SPVG-CH2(Z83314)的相似性分别为98.1%和85.5%。将CP基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPVG外壳蛋白的特异性抗血清。间接ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甘薯样品的检测。

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