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鸡柔嫩艾美耳球虫HN株3-1E基因的原核表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 张艳 1 ; 刘海隆 1 ; 曹宗喜 1 ; 林哲敏 1 ; 谭树义 1 ;

作者机构： 1.海南省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 柔嫩艾美耳球虫;海南株;3-1E基因;原核表达

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2015 年 47 卷 01 期

页码： 33-37

收录情况： 北大核心

摘要： 根据已报道的柔嫩艾美耳球虫3-1E基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增得到1条特异片段,将扩增产物克隆至p MD-18T载体,转化感受态菌JM109,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与已发表的国内外相关虫株的3-1E基因序列比较,核苷酸的同源性均在99.2%~99.8%,氨基酸的同源性均在98.2%~100%。然后将重组质粒和表达载体p GEX-4T-1分别用Xho I和EcoR I酶切后构建重组表达载体p GEX-3-1E,并将其转化入大肠杆菌BL21中,提取质粒经酶切和PCR鉴定正确后,用IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测显示,3-1E基因在大肠杆菌中成功表达,融合蛋白的分子量为44.7 ku,诱导表达5 h的蛋白表达量可达到30%以上。

  • 相关文献

[1]柔嫩艾美耳球虫海南株3-1E基因的克隆与序列分析. 张艳,刘海隆,曹宗喜,林哲敏,谭树义. 2014

[2]鸡柔嫩艾美耳球虫海南株SO7基因表达产物的免疫保护效果观察. 张艳,刘海隆,林哲敏,曹宗喜,邢漫萍. 2017

[3]鸡柔嫩艾美耳球虫HN株SO7基因的克隆与序列分析. 张艳,刘海隆,曹宗喜,林哲敏,谭树义,邢漫萍. 2016

[4]PCV-2海南株ORF2基因的克隆及序列分析. 曹宗喜,林哲敏,叶保国,张艳,郑心力,黄丽丽,王峰. 2015

[5]猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备. ZHANG Yan,张艳,WANG Wen-xiu,王文秀,LIU Hai-long,刘海隆,CAO Zong-xi,曹宗喜,TAN Shu-yi,谭树义. 2018

[6]猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备. 张艳,王文秀,刘海隆,曹宗喜,谭树义. 2019

[7]巴马香猪氨基肽酶N截短基因的克隆与原核表达. 王文秀,张艳,王宝琴,谢金文,刘博,沈志强. 2017

[8]海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达. 杨成龙,刘姣,周扬,李瑞梅,段瑞军. 2014

[9]象耳豆根结线虫Me-mapk1基因的克隆及RNAi分析. 魏丽莎子,龙海波,陈绵才,赵志祥. 2016

[10]水芹HSP90基因的原核表达及条件优化. 胡艳平,蔡兴来,周曼,王敏,朱白婢,黄文枫,廖道龙,陈贻诵. 2019

[11]橡胶树3个可溶性无机焦磷酸酶基因的原核表达. 朱家红,徐靖,于晓惠,畅文军,张治礼. 2013

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