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电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化

文献类型: 中文期刊

作者: 李炜杰 1 ; 杨娇 1 ; 王聪慧 1 ; 罗健 2 ; 周平 2 ; 黄威 3 ; 姚建龙 4 ; 何高明 1 ; 皮文辉 2 ;

作者机构: 1.石河子大学动物科技学院

2.新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室

3.新疆生产建设兵团第五师91团

4.伊宁县动物卫生监督所

关键词: 绵羊成纤维细胞;细胞转染;转染效率;条件优化

期刊名称: 新疆农业科学

ISSN: 1001-4330

年卷期: 2015 年 52 卷 08 期

页码: 1481-1485

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率。【方法】利用Lonza 4D—Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊成纤维细胞中,通过流式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率。【结果】通过测定细胞转染效率,得到较佳电转方案:L电转液100μL悬浮绵羊成纤维细胞,采用CZ-167电转程序,质粒浓度4 g,2×106个细胞,电击一次,电转后37℃放置10 min可获得理想的转染效率。

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