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双重PCR快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌

文献类型: 中文期刊

作者: 黎炯 1 ; 叶星 1 ; 卢迈新 1 ; 邓国成 1 ; 田园园 1 ; 江小燕 1 ; 黎坚平 2 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院

2.广东省水产技术推广站

关键词: 双重PCR;无乳链球菌;海豚链球菌;cfb基因;16SrRNA

期刊名称: 湖南农业大学学报(自然科学版)

ISSN: 1007-1032

年卷期: 2010 年 36 卷 04 期

页码: 449-452

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据无乳链球菌的cfb基因和海豚链球菌16SrRNA基因序列,设计、合成2对引物,优化扩增条件,建立了快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌的双重PCR方法.用该方法扩增无乳链球菌和海豚链球菌,可分别获得474、296bp的特异性片段,扩增嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌等其他常见鱼病原菌无特异性片段.该方法可实现对无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,具较高的灵敏度,可检测到基因组含量分别为3.2×10-3ng/μL的无乳链球菌和3.0×10-2ng/μL的海豚链球菌.对采集自广东与海南两省养殖罗非鱼病鱼的11份病原样品进行检测,均可获得474bp片段,测序与BLAST分析结果表明,扩增到的序列均为无乳链球菌cfb基因序列,可从分子水平上确定这些样品为无乳链球菌,与生化鉴定结果一致.

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