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大口黑鲈虹彩病毒双重PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 王庆 1 ; 曾伟伟 1 ; 刘春 1 ; 马冬梅 1 ; 石存斌 1 ; 吴淑勤 1 ;

作者机构： 1.农业部渔药创制重点实验室/广东省水产动物免疫技术重点实验室/中国水产科学研究院珠江水产研究所

关键词： 大口黑鲈;虹彩病毒;蛙病毒属;肿大细胞病毒属;虹彩病毒主衣壳蛋白基因;双重PCR

期刊名称： 华中农业大学学报

ISSN： 1000-2421

年卷期： 2013 年 04 期

页码： 106-110

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为同时检测患病大口黑鲈中不同属虹彩病毒感染和带毒情况,针对蛙病毒属和肿大细胞病毒属大口黑鲈虹彩病毒主衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因的序列,分别设计1对特异性引物Rana-mcp F/R和Mega-mcp F/R,扩增产物片段大小分别为475 bp和262 bp。通过PCR反应体系的优化、反应的特异性和灵敏度试验,建立一种可以同时检测大口黑鲈蛙病毒属和肿大细胞病毒属虹彩病毒感染的双重PCR检测方法,最低DNA检测量分别为6.5 pg和14.5 pg。用此方法,对临床获得的15个大口黑鲈样品进行双重PCR检测和序列测定,获得5个蛙病毒属和1个肿大细胞病毒属虹彩病毒检测阳性结果。本研究中建立的基于MCP基因的大口黑鲈虹彩病毒双重PCR检测方法,可用于养殖大口黑鲈虹彩病毒病快速鉴别诊断和分子流行病学调查。

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