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减蛋下降综合征病毒重组Knob-S基因在杆状病毒系统中的表达及其免疫原性鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 郑金 1 ; 陈滔 1 ; 陆吉虎 2 ; 高峰 1 ; 候继波 2 ; 黎满香 1 ; 唐应华 2 ;

作者机构: 1.湖南农业大学动物医学院

2.江苏省农业科学院/国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词: 减蛋下降综合征病毒;重组Knob-S;真核表达;杆状病毒表达系统

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2015 年 03 期

页码: 600-603

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为以杆状病毒系统在Sf9细胞中表达含减蛋下降综合征病毒(EDSV)重组Knob-S蛋白质来制备亚单位疫苗,采用PCR方法从鸭胚繁殖的EDSV尿囊液中扩增Knob-S基因,并克隆到p Fast Bac1中,经转化DH10Bac获得重组r Bac-Knob-S。将r Bac-Knob-S转染Sf9细胞获得重组杆状病毒,利用重组杆状病毒感染Sf9细胞表达重组蛋白质。重组Knob-S蛋白质经Western blotting和间接免疫荧光试验鉴定均为阳性。将重组Knob-S蛋白质制备成疫苗,按1羽0.3 ml(含50μg的重组病毒)免疫6周龄非免海兰褐雏鸡,在免疫后第2周可检测到血凝抑制抗体效价达8.5 lg2,在第3周达到高峰(9.5 lg2),表明重组Knob-S蛋白质具有较好的免疫原性。

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