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棉花VIGS病毒载体的构建及其在抗病基因功能鉴定的应用

文献类型: 中文期刊

作者: 李建平 1 ; 郝晓燕 1 ; 李琴 1 ; 高升旗 1 ; 常晓春 1 ; 陈勋基 1 ; 足木热木·吐尔逊 1 ; 陈果 1 ; 黄全生 1 ;

作者机构: 1.新疆农业科学院核技术生物技术研究所

关键词: 棉花;钙依赖蛋白基因;VIGS;黄萎病

期刊名称: 新疆农业科学

ISSN: 1001-4330

年卷期: 2018 年 55 卷 07 期

页码: 1203-1208

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】利用农杆菌介导的VIGS基因沉默技术,研究陆地棉抗病相关基因在棉花抗黄萎病中的功能。【方法】利用分子生物学技术构建VIGS病毒载体,建立VIGS病毒诱导沉默体系;利用此体系将棉花中的一个钙依赖蛋白(CDPK)基因,通过农杆菌介导在陆地棉中沉默,根据此基因沉默植株在病原菌环境下的发病情况研究该基因在棉花抗病中的功能。【结果】利用包含有Gh CPK抗病基因片段的VIGS病毒载体的农杆菌侵染棉花子叶,病毒载体上的目的基因片段由RNA聚合酶识别并合成双链RNA(double stranded RNA,dsRNA),dsRNA由Dicer酶识别并于其它RNA形成RNA诱导的沉默复合体(RNA induced silencing complex,RISC),RISC对内源Gh CPK mRNA进行识别和切割作用,内源Gh CPK mRNA降解而发生基因沉默。Gh CPK基因沉默导致棉苗对黄萎病敏感性增加,证明Gh CPK基因参与调控棉花抗病功能。【结论】病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)能够快速有效的研究Gh CPKs基因在棉花抗病中的功能。

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