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丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740的克隆表达和免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 张靖鹏 1 ; 江锦秀 1 ; 林裕胜 1 ; 游伟 1 ; 胡奇林 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 丝状支原体山羊亚种;特异基因;原核表达;免疫原性

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2019 年 10 期

页码： 1124-1128

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】构建表达丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740的重组表达菌,为Mmc-3740蛋白的进一步研究与应用奠定基础。【方法】采用PCR技术从Mmc-47中扩增出该基因,进行克隆、测序,将克隆质粒与pET-28a分别双酶切,回收正确的片段进行连接构建重组表达质粒,转化至表达菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,产物用SDS-PAGE检测,用镍柱对其纯化后免疫小鼠获得高免血清,并进行Western-blot验证。【结果】成功构建了克隆和表达载体,重组菌表达目的蛋白大小约21 ku。表达产物通过镍柱纯化后可得到单一的目的蛋白条带,Western-blot检测结果显示所表达的目的蛋白有较好的免疫原性。【结论】成功在BL21(DE3)宿主菌内表达了Mmc-3740重组蛋白。

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