文献类型： 中文期刊

作者： 朱万豪 ¹ ; 葛建镕 ¹ ; 刘志浩 ¹ ; 梁紫越 ¹ ; 任星旭 ¹ ; 赵怡锟 ¹ ; 王凤格 ¹ ; 闫明明 ¹ ;

作者机构： 1.北京市农林科学院玉米研究中心玉米DNA指纹及分子育种北京市重点实验室

关键词： 玉米种子;DNA提取;分子检测;蛋白酶K

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2025 年 23 卷 016 期

页码： 5365-5371

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： DNA提取是应用DNA指纹鉴定技术进行分子检测的关键步骤，常见的DNA提取方法在DNA质量、提取速度、试剂危害程度、提取成本等方面皆有不足之处，因此，发展高效、经济、便捷的提取方法十分必要。本研究以玉米种子为材料，使用含蛋白酶K的SDS提取液，利用PCR仪进行提取程序，建立了一种DNA快速提取新方法。方法为使用的提取液含100μg/mL蛋白酶K,SDS含量推荐0.3%～0.7%，提取程序为55℃25 min、95℃10 min、4℃保存。由该方法提取的DNA琼脂糖凝胶电泳谱带清晰明亮，DNA链完整度较好，DNA质量较高；使用玉米纯度及真实性SSR引物进行PCR扩增，荧光毛细管电泳检测表明，引物扩增结果良好，荧光信号强，扩增峰型和片段大小与预期相符，背景干净无杂峰，DNA提取量及质量满足纯度及真实性检测的要求。该方法操作简单，96个样品的提取时间约为30 min，所提取的DNA可以很好地应用到后期的PCR反应中。该方法具备实际检测应用价值，尤其适用玉米种子的分子检测。