文献类型: 中文期刊
作者: 张立春 1 ; 刘晓辉 1 ; 曹阳 1 ; 于永生 1 ; 朴庆林 1 ; 金海国 1 ; 王晓阳 1 ;
作者机构: 1.吉林省农业科学院
关键词: Fat-1基因;线虫;密码子优化;载体构建
期刊名称: 生物技术通讯
ISSN: 1009-0002
年卷期: 2012 年 23 卷 03 期
页码: 393-396+422
摘要: 目的:为使线虫Fat-1基因能够在牛中高效表达,通过密码子优化及全基因合成方法制备Fat-1基因,并构建其转基因表达载体。方法:通过生物信息学手段,将来源于线虫的Fat-1基因以牛为表达宿主进行密码子优化,将优化后的Fat-1基因命名为bFat-1;通过全基因合成方法获得bFat-1基因,构建pcDNA3.1-bFat-1真核表达载体。结果:通过密码子优化,影响Fat-1基因在牛中表达的密码子适应指数、优势密码子频率及GC含量等各项指标均有显著改善;全基因合成、克隆及测序结果显示已获得bFat-1基因;构建并鉴定了pcDNA3.1-bFat-1载体。结论:获得了适合牛体表达的Fat-1基因并构建了其转基因载体,为获得高效表达Fat-1基因的转基因牛细胞系奠定了基础。
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