文献类型： 中文期刊

作者： 白云凤 ¹ ; 聂江婷 ² ; 张忠梁 ¹ ; 李平 ¹ ; 张维锋 ¹ ; 闫建俊 ¹ ; 冯瑞云 ¹ ; 张耀 ¹ ;

作者机构： 1.山西省农业科学院作物科学研究所

2.山西大学生物工程学院

关键词： 籽粒苋;AhNAD-ME;序列特征;表达模式;原核表达

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2014 年 40 卷 12 期

页码： 2192-2197

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： NAD(P)-苹果酸酶催化苹果酸氧化脱羧,产生丙酮酸和CO2,伴随NAD(P)的还原。在C4植物中,苹果酸酶参与了C4光合作用。本研究对克隆的双子叶C4植物籽粒苋NAD-苹果酸酶基因(AhNAD-ME)编码的氨基酸序列进行了生物信息学分析,结果表明,AhNAD-ME具有苹果酸酶的完整功能域,包括苹果酸N端结构域和苹果酸酶的NAD结合结构域;进化树表明,该序列属于NAD-ME的α亚基,该亚基定位于线粒体基质中。半定量RT-PCR分析表明,该基因主要在叶片和茎中表达,表达量随光照时间延长而增加。将AhNAD-ME基因重组到原核表达载体pEASY-E1中,电击法转化到大肠杆菌Transette(DE3)菌株中,IPTG诱导其高效表达,表达的融合蛋白的分子量与预期相符,主要以包涵体形式存在。