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刺葡萄DFR基因植物表达载体构建及转化茉莉花愈伤组织的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 甘煌灿 1 ; 赖呈纯 2 ; 潘红 2 ; 朱育菁 3 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院农业工程技术研究所;福建省农业科学院农业生物资源研究所

2.;福建省农业科学院农业工程技术研究所;福建省农业科学院农业生物资源研究所

3.;福建省农业科学院农业工程技术研究所;福建省农业科学院农业生物资源研究所;

关键词： 茉莉花;DFR基因;植物表达载体;愈伤组织;遗传转化

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2018 年 06 期

页码： 1128-1136

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究以从刺葡萄克隆获得的DFR基因为目的基因,同时从质粒p CAMBIA1302中扩增获得Ca MV35S启动子和NOS终止子,并利用双酶切法构建由Ca MV35S启动子驱动DFR基因且带有NOS终止子的表达载体,验证测序结果显示成功构建了p CAMBIA1302-35S-DFR-NOS植物表达载体,并将该载体转化到农杆菌EHA105中。采用农杆菌注射渗透法转化烟草叶片进行瞬时表达,经鉴定,转化后的烟草叶片中能检测到GFP基因的表达。采用农杆菌介导法将该植物表达载体转化受体茉莉花愈伤组织,经多轮抗性筛选获得了转基因抗性愈伤组织,经PCR鉴定,茉莉花转基因抗性愈伤组织中检测到GFP、Hyg和DFR基因等的存在,初步证明目的基因DFR已成功整合到宿主的基因组中。茉莉花愈伤组织遗传转化体系的建立,验证了花色苷合成相关基因转化茉莉花愈伤组织的可行性,为今后通过植物转基因技术丰富茉莉花的花色奠定基础。

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