文献类型： 中文期刊

作者： 刘振兴 ¹ ; 张殿昌 ¹ ; 苏天凤 ¹ ; 姜巨峰 ¹ ; 龚世园 ² ; 江世贵 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院南海水产研究所

2.华中农业大学水产学院

关键词： 黄鳍棘鲷;免疫球蛋白;纯化;兔抗血清;ELISA

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2008 年 15 卷 01 期

页码： 129-135

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 分别采用Sepharose-6B凝胶过滤层析、Phenyl Sepharose FF疏水作用层析和rProtein A Sepharose亲和层析技术纯化黄鳍棘鲷(Acanthopagrus latus)血清IgM,并将这3种层析纯化方法进行了比较。纯化产物进行SDS-PAGE,电泳结果扫描后经Band Scan5.0软件分析显示,单独使用Sepharose-6B凝胶过滤层析或Phenyl Sepharose FF疏水作用层析得到的IgM纯度只有56%左右;二者联合使用纯度可以达到69%,而rProtein A Sepharose亲和层析一步就可以达到89%的纯度;纯化得到的黄鳍棘鲷血清IgM的重链和轻链分子量分别为73.6kD和26.5kD。本研究还以rProtein A Sepharose亲和层析纯化的黄鳍棘鲷血清IgM为抗原,制备其兔抗血清,采用WesternBlot和双向琼脂扩散检测抗血清免疫学活性,并用间接ELISA检测其效价达到1∶25600,为进一步开展黄鳍棘鲷免疫学方面的研究奠定了基础。