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水稻干尖线虫14-3-3(Ab-14-3-3-a)基因克隆与功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 魏利辉 1 ; 冯辉 1 ; 张金凤 1 ; 陈曦 1 ; 杨红福 1 ; 姚克兵 1 ;

作者机构: 1.南京农业大学植物保护学院;江苏省农业科学院植物保护研究所;省部共建国家重点实验室培育基地—江苏省食品质量安全重点实验室;江苏丘陵地区镇江农业科学研究所

关键词: 水稻干尖线虫;14-3-3蛋白;基因克隆;RNA干扰

期刊名称: 植物病理学报

ISSN: 0412-0914

年卷期: 2018 年 04 期

页码: 527-536

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 水稻干尖线虫是水稻上重要的寄生线虫,严重危害水稻安全生产。14-3-3蛋白调控生物体的细胞代谢、生长发育和逆境适应等一系列生物过程。本研究通过c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)分离获得了一个水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)14-3-3基因,命名为Ab-14-3-3-a。Ab-14-3-3-a全长c DNA序列含有59 bp的5'非翻译区(UTR)、编码251个氨基酸756 bp的开放阅读框。Ab-14-3-3-a DNA序列包含4个外显子和3个内含子。Ab-14-3-3-a蛋白与其他植物寄生线虫14-3-3蛋白氨基酸序列高度相似,系统发育树显示与植物寄生线虫位于同一进化分支。原位杂交显示Ab-14-3-3-a特异定位于成虫的背食道腺细胞中,表明其在线虫取食和寄生过程中发挥潜在功能。qRT-PCR显示,Ab-14-3-3-a在水稻干尖线虫各个龄期均表达,其中在成虫表达水平最高,而在发育过程中幼虫表达水平最低。当线虫取食不同寄主时,Ab-14-3-3-a的表达水平具有差异性,线虫取食感病水稻早期,Ab-14-3-3-a表达水平上升1.5倍,而取食灰葡萄孢(Botrytis cinerea)时Ab-14-3-3-a表达可提高数百倍。利用体外RNA干扰技术将Ab-14-3-3-a的表达进行有效抑制,结果显著影响了线虫的产卵、成虫发育以及线虫种群数量。综上,Ab-14-3-3-a参与调控水稻干尖线虫的取食行为和发育进程。本研究相关结果有助于拓展植物寄生线虫14-3-3蛋白功能,为深入研究线虫与植物互作机制提供了理论依据。

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