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中国水仙NtCCHC锌指蛋白基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 邹晖 1 ; 李海明 1 ; 王伟英 1 ; 林江波 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院亚热带农业研究所

关键词： 中国水仙;锌指蛋白;基因克隆;蛋白表达

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2019 年 008 期

页码： 889-893

收录情况： CSCD

摘要： [目的]利用建立的多效唑诱导中国水仙的SSH文库,克隆中国水仙NtCCHC锌指基因的cDNA序列,进行原核表达,为深入研究NtCCHC锌指基因在中国水仙中的功能奠定基础.[方法]采用Trizol法提取多效唑处理后的中国水仙叶片总RNA,反转录成cDNA后,根据已知的CCHC锌指蛋白基因序列设计引物进行基因克隆和同源性分析,并构建原核表达载体进行诱导表达.[结果]克隆一段810bp的cDNA编码区序列,编码269个氨基酸,同源性分析表明与多个物种的CCHC基因存在着较高的同源性,命名为NtCCHC.该基因能成功在pGEX-4T-3原核表达载体上实现诱导表达,系统进化树分析表明:NtCCHC与中国莲遗传距离最近.[结论]克隆了中国水仙NtCCHC基因序列,并成功诱导表达.

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