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玉蜀黍黑粉菌环介导等温扩增检测体系的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 段丽萍 1 ; 曹言勇 1 ; 李会勇 1 ; 陈洵 1 ; 石磊 1 ;

作者机构： 1.暨南大学食品安全与营养研究院;河南省农业科学院粮食作物研究所

关键词： 玉蜀黍黑粉菌;环介导等温扩增(LAMP);qPCR

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2018 年 04 期

页码： 482-491

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本文根据玉蜀黍黑粉菌(Ustilago maydis)的Um Pep1、UmPit2和UmSee1基因各设计4套环介导等温扩增(LAMP)引物,从中筛选出1套引物对LAMP反应体系进行3因素(Bst DNA聚合酶浓度、Mg2+浓度、内外引物浓度比)3水平的优化试验。并对优化的U.maydis LAMP反应体系进行特异性、灵敏度及田间检测可行性试验。特异性试验表明,该方法能特异性检测U.maydis,而与其他病原菌的DNA没有交叉反应;灵敏度试验表明,该反应体系的最低检出限为44 fg·μL-1p Easy-Pep质粒DNA,制作的标准曲线可对U.maydis进行定量分析。该方法也适用于在U.maydis侵染前或侵染早期对田间样品进行检测,对现场采集的172份田间样品进行检测,其中140个样品显示为阳性。本研究所建立的LAMP体系具有特异性好、灵敏度高、重复性好的特点,并能在45 min内完成对田间样品的检测,是快速、定量检测U.maydis的有效手段。

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