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沙冬青脱水素基因的克隆及表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 乔慧蕾 1 ; 王瑞刚 1 ; 郭九峰 2 ; 孙国琴 2 ; 李国婧 1 ;

作者机构： 1.内蒙古农业大学

2.内蒙古农牧业科学院

关键词： 脱水素;克隆;植物表达载体;沙冬青

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2009 年 24 卷 04 期

页码： 92-95

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究沙冬青脱水素的功能,根据沙冬青cDNA文库中脱水素基因序列设计引物,采用PCR技术进行了脱水素基因的扩增,扩增产物与载体pGM-T载体连接,转化大肠杆菌Top10,筛选阳性克隆,测序结果表明,已成功克隆的阳性重组子经测序鉴定其片段大小与已知沙冬青cDNA文库中脱水素基因大小一致,为760 bp,说明此序列无内含子。将成功克隆的阳性重组子提取质粒与pCAMBIA3301质粒同样进行酶切反应,再以T4DNA连接酶连接,成功构建了脱水素基因的植物表达载体,为下一步的抗逆性研究打下了基础。

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