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Bt(Cry1F)毒素多克隆抗体制备及其检测应用

文献类型: 中文期刊

作者: 徐重新 1 ; 程诚 1 ; 张霄 1 ; 刘媛 1 ; 仲建锋 1 ; 胡晓丹 1 ; 张存政 1 ; 刘贤金 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所省部共建国家重点实验室培育基地——江苏省食品质量安全重点实验室农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室

关键词: Bt毒素;Cry1F毒素;多克隆抗体;时间分辨荧光免疫分析

期刊名称: 农产品质量与安全

ISSN: 1674-8255

年卷期: 2016 年 04 期

页码: 47-51

摘要: 通过免疫新西兰大白兔,制备并纯化Bt(Cry1F)毒素多克隆抗体,建立针对Cry1F毒素检测的免疫学分析方法,用于室内分析毒素在农产品和土壤中的残留情况。采用皮下注射法,经4次级联免疫,获得免疫血清效价为1:2 500 000,经柱纯化后,测得抗体浓度为4.70 mg/m L;并以其建立的针对Cry1F毒素的间接非竞争时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA),测得线性检测范围在0.04~2 000 ng/m L,最低检测灵敏度为0.03 ng/m L,对5种供试毒素类似物(Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry2A)均具一定交叉识别能力。分别以稻米和黄土为基质,进行添加回收试验,测得批内、批间的稳定性和重复性均达到室内仪器检测要求。

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