文献类型： 中文期刊

作者： 南铁贵 ¹ ; 何素平 ¹ ; 谭桂玉 ¹ ; 李刚 ¹ ; 王保民 ¹ ; 黄璐琦 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业大学农学与生物技术学院;吉林省农业科学院农业环境与资源研究中心;中国中医科学院中药研究所

关键词： 马兜铃酸A;单克隆抗体;中药;酶联免疫分析法

期刊名称： 分析化学

ISSN： 0253-3820

年卷期： 2010 年 08 期

页码： 1206-1210

收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用活化酯法,将马兜铃酸A分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,得到免疫抗原马兜铃酸A-BSA和包被抗原马兜铃酸A-OVA。利用马兜铃酸A-BSA免疫Balb/c小鼠,制得鼠单克隆抗体1A11,单抗效价为2×104;单抗为IgG1类,轻链为κ型;与其结构类似物马兜铃酸B、C和D的交叉反应率分别为2.8%,3.5%和31.2%。基于抗马兜铃酸A单克隆抗体的间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA)的IC50为1.9μg/L,检测范围为0.5～7.5μg/L。icELISA添加回收率为86%～97%,相对标准偏差在5.2%～11.1%之间。利用所建立的icELISA测定了6个中药材和5个中成药中马兜铃酸A的含量,并用高效液相色谱法(HPLC)进行了验证,其中关木通、广防己、天仙藤、马兜铃和青木香中均检测出马兜铃酸A,而川木通和5个中成药中未检测到马兜铃酸A。结果表明:本方法可用于中药中马兜铃酸A的快速检测。