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试管捕捉实时荧光RT-PCR法同时检测烟草花叶病毒病和马铃薯Y病毒病

文献类型： 中文期刊

作者： 任锡毅 1 ; 刘永翔 2 ; 黄永会 2 ; 刘作易 3 ;

作者机构： 1.贵州省生物技术研究所;贵州省农业生物技术重点实验室;贵州省农业科学院

2.;贵州省生物技术研究所;贵州省农业生物技术重点实验室;贵州省农业科学院

3.;贵州省生物技术研究所;贵州省农业生物技术重点实验室;贵州省农业科学院;

关键词： 烟草花叶病毒;马铃薯Y病毒;实时荧光RT-PCR;检测

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2017 年 06 期

页码： 96-100

收录情况： 北大核心

摘要： 为建立一套简单、快速、有效的病毒病检测方法,避开病毒病检测中分子生物学方法检测时RNA提取这一复杂、费时、费力的过程,且能在同一个反应中同时检测多种病毒病,对我国常见的2种烟草病毒的外壳蛋白基因部分序列设计引物和Taq Man探针,结合实时荧光逆转录PCR(RT-PCR)和试管捕捉RT-PCR法,对实时荧光RT-PCR法加以改进,与双抗夹心酶联免疫法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbant assay,简称DAS-ELISA)和试管捕捉RT-PCR法进行比较,并在此基础上构建多重试管捕捉实时荧光RT-PCR检测体系。结果首次成功构建能同时检测烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒的多重试管捕捉实时荧光RT-PCR检测体系。该技术无须提取RNA,包括叶片研磨、捕捉、反转录、荧光PCR扩增等步骤,简单快捷、省时省力,具有高效性、系统性和经济简便性等特点。

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