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高羊茅抗真菌病基因转化的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 马生健 1 ; 徐碧玉 2 ; 曾富华 2 ; 卢向阳湖南农业大学生物技术系 2 ;

作者机构： 1.湛江师范学院生物系

2.湛江师范学院生物系,中国热带农业科学院热带作物国家重点实验室,湛江师范学院生物系 广东湛江524048湖南农业大学生物技术系,湖南长沙410128,海南海口571101,广东湛江524048

关键词： 高羊茅;草坪草;农杆菌;转化;真菌

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2006 年 33 卷 06 期

页码： 1275-1280

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过农杆菌介导法将双价载体(含抗真菌病的几丁质酶基因Chi和β-1,3-葡聚糖酶基因Glu)导入高羊茅愈伤组织细胞内,建立了高羊茅的农杆菌转化体系,获得了抗真菌病的转基因高羊茅植株。在转化过程中,确定了卡那霉素(Kan)筛选剂的浓度以200～300mg/L为宜,联合运用羧苄青霉素(Carb)与头孢霉素(Cef)作为抗菌素能得到好的脱菌效果;农杆菌的几种共培养方式对转化频率的影响表明,共培养基上垫一层滤纸,愈伤周围滴加浸染液,恢复培养1周后用甘露醇和抗生素液洗涤,是一种好的转化方式。对转化植株进行PCR分析和分子杂交及禾谷镰刀菌挑战接种,发现转化植株有高阳性率及抗真菌能力。

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