文献类型： 中文期刊
作者： 金李萍 1 ; 潘晓艺 2 ; 蔺凌云 2 ; 姚嘉赟 2 ; 曹铮 2 ; 尹文林 2 ; 赖迎迢 3 ; 陶家发 3 ; 刘忆瀚 2 ; 沈锦玉 1 ;
作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院
2.浙江省淡水水产研究所
3.中国水产科学研究院珠江水产研究所
关键词： 鲤疱疹病毒Ⅱ型;RNA干扰;ORF57;小干扰RNA;异育银鲫脊髓细胞系;TCID50
期刊名称： 水生生物学报
ISSN： 1000-3207
年卷期： 2022 年 46 卷 004 期
页码： 537-544
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 研究通过在异育银鲫脊髓细胞系(Spinal cord tissue cell lines of Carassius auratus gibelio,CSC)中对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF57进行RNA干扰,以探究其对CyHV-2病毒复制的影响.首先,以FAM标记的异育银鲫β-actin的siRNA进行CSC细胞转染条件的优化,再将针对CyHV-2 ORF57基因设计的3条siRNA,转染CSC细胞,并进行病毒感染,评估siRNA对病毒复制和致细胞病变的影响.转染条件优化结果显示,在siRNA浓度为80 nmol/L,转染液维持24h后更换维持液,β-actin基因表达量最低且观察到的荧光点数量最多.而ORF57-siRNAs干扰结果显示,ORF57-siRNA-2组表现出了较强的抑制效果,在接毒48h时,ORF57-siRNA-2处理组的ORF57基因表达量降到相对于Mock组的33.55%(P<0.01),并且各ORF57-siRNA组都表现出了延缓CyHV-2致细胞病变的时间和强度,抑制时间可达120h.TCID50结果显示,不同组的ORF57-siRNAs均能降低病毒滴度,其中ORF57-siRNA-2将病毒原液TCID50108.487/mL下降至106.776/mL.研究结果表明,干扰ORF57的表达可大大降低CyHV-2的致细胞病变力和复制率,ORF57在CyHV-2复制与致细胞病变中起重要作用.本研究为CyHV-2基于siRNA技术的抗病毒治疗和弱毒株的改造提供了借鉴.
- 相关文献
[1]Development of indirect immunofluorescence assay for TCID50 measurement of grass carp reovirus genotype II without cytopathic effect onto cells. Wang, Qing,Xie, Hualiang,Zeng, Weiwei,Liu, Chun,Wu, Jiexing,Wang, Yingying,Li, Yingying,Xie, Hualiang,Wang, Linchuan,Bergmann, Sven M.. 2018
[2]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25截短蛋白的多克隆抗体制备与免疫原性分析. 周勇,史玉恒,范玉顶,刘文枝,江南,赵建青,许晨,曾令兵. 2018
[3]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25截短蛋白的多克隆抗体制备与免疫原性分析. 周勇,史玉恒,范玉顶,刘文枝,江南,赵建青,许晨,曾令兵. 2018
[4]鲤疱疹病毒Ⅱ型TaqMan real-time PCR检测方法的建立及应用. 周勇,曾令兵,张辉,范玉顶,徐进. 2013
[5]鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备. 彭俊杰,张琪,贾路路,林蠡,袁军法,曾令兵,周勇,刘学芹. 2017
[6]异育银鲫感染鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)后血液生理生化指标变化的研究. 刘文枝,曾令兵,张辉,杨星,徐进,江南,周勇,马杰. 2013
[7]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25B编码蛋白诱饵载体的构建及其互作蛋白的筛选. 聂细荣,薛明洋,林格,李逸群,范玉顶,刘文枝,孟彦,江南,曾令兵,周勇. 2021
[8]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF4基因的克隆、表达与免疫学检测方法. 周勇,范玉顶,徐进,马杰,江南,刘文枝,曾令兵. 2017
[9]RNA干扰UGP基因表达对三角褐指藻碳流分配的影响. 朱葆华,常雅青,何文栋,杨官品,李赟,潘克厚. 2017
[10]凡纳滨对虾E75基因可变剪切形式的鉴定与分析. 杜江丽,张晓军,张小溪,袁剑波,高羿,李富花,相建海. 2019
[11]斑节对虾MKK7基因的克隆及在不同胁迫条件下的表达分析. 范红弟,李运东,杨其彬,姜松,杨丽诗,黄建华,江世贵,张汤生,周发林. 2020
[12]克氏原螯虾自噬相关基因PcAtg2的克隆及其在白斑综合征病毒胁迫下的表达分析. 祝孟茹,问露洁,占铭,公洁,席昌俊,闻海波,沈怀舜. 2023
[13]克氏原螯虾细胞色素c基因通过调节凋亡途径抑制WSSV感染. 公洁,祝孟茹,占铭,席昌俊,神国卿,水燕,徐增洪,沈怀舜. 2023
[14]石斑鱼神经坏死病毒RNA干扰的转染条件优化与效果分析. 黄桂菊,喻达辉,柳明,潘俐玲,王晓宁. 2011
[15]RNAi-基因沉默的分子机理. 耿波,曹顶臣,孙效文,欧阳红生. 2005
[16]三疣梭子蟹Pt-ddit4l基因的克隆及表达分析. 阎德平,吕建建,陆璇,张文,题兴斌,宋柳,刘萍. 2021
[17]一种大规模制备双链RNA的简单方法及其在斑节对虾中的应用. 梁艳,Vanvimon Saksamerprome,Kallaya Sritunyalucksan,黄倢. 2010
[18]青虾Ran基因的克隆、表达及其在卵巢发育中的功能. 卜宗元,傅洪拓,孙盛明,乔慧,金舒博,张文宜,龚永生,蒋速飞,熊贻伟,吴滟. 2017
[19]石斑鱼神经坏死病毒RNA干扰的. 黄桂菊,喻达辉,柳明,潘俐玲,王晓宁,曾令兵,龙华. 2011
[20]日本对虾Bcl-2基因的cDNA克隆与抗寒功能研究. 邵慧鑫,任宪云,于振兴,李健,刘萍. 2022
作者其他论文 更多>>
-
大口黑鲈MsIL-21基因的克隆、表达及其对细菌感染的应答特征
作者：朱雪晴;赵飞;邓玉婷;谭爱萍;赖迎迢;巩华;黄志斌;荆鹏华
关键词：白细胞介素-21 (IL-21);大口黑鲈;维氏气单胞菌;鰤诺卡氏菌;免疫防御
-
维氏气单胞菌CA07株灭活疫苗生产工艺的优化
作者：孙承文;巩华;赖迎迢;江小燕;任燕;陈总会;黄志斌;陶家发
关键词：维氏气单胞菌;灭活疫苗;生产工艺;安全性;免疫原性
-
大口黑鲈白皮病病原菌的分离鉴定及药物敏感性试验
作者：谭爱萍;赵飞;郭忠宝;邓玉婷;张瑞泉;赖迎迢;黄志斌;姜兰
关键词：大口黑鲈;维氏气单胞菌;生长特性;毒力基因;药物敏感性
-
浸泡免疫中的抗原呈递及其佐剂研究进展
作者：巩华;胡军娜;任燕;赖迎迢;黄志斌
关键词：浸泡免疫;抗原呈递;佐剂;鱼用疫苗;黏膜免疫
-
一株湖北源大口黑鲈蛙病毒的分离鉴定
作者：罗晓雯;沈锦玉;阳涛;曾令兵;周勇;范玉顶;刘文枝;李逸群;薛明洋;孟彦;江南
关键词：大口黑鲈;蛙病毒;细胞培养;病毒分离鉴定;
-
一株维氏气单胞菌发酵培养基优化及其制备疫苗免疫效力比较
作者：孙承文;江小燕;赖迎迢;赵长臣;刘春花;任燕;巩华;陈总会;陶家发
关键词：维氏气单胞菌;灭活疫苗;鲫鱼;发酵培养基;响应面分析;免疫效力
-
微型生物养护剂养殖加州鲈对比试验
作者：韦木莲;李湘妮;常藕琴;赖迎迢;余家纯;黄龙;丁成章;蒙烽;吴雅丽
关键词：
