文献类型： 中文期刊

作者： 周恒 ¹ ; 沈海燕 ² ; 郭鹏举 ² ; 张春红 ² ; 张建峰 ² ; 刘志成 ² ; 孙俊颖 ² ; 李玉谷 ¹ ;

作者机构： 1.华南农业大学兽医学院

2.广东省农业科学院动物卫生研究所

关键词： 猪IFN-λ3;原核表达;抗病毒活性

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2015 年 35 卷 01 期

页码： 86-90

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 应用RT-PCR技术从多聚肌苷酸多聚胞苷酸(poly(I∶C))刺激的ST细胞中扩增猪干扰素-λ3(PoIFN-λ3)基因。基因序列分析表明,PoIFN-λ3基因全长为588bp,与绵羊IFN-λ3基因(XM_004015683)的同源性最高(87.6%);分子遗传进化树分析表明猪IFN-λ3与牛、绵羊亲缘关系最近,与马、人、黑猩猩和鸡的亲缘关系次之。将PoIFN-λ3成熟肽序列定向插入pET-32a载体,转化宿主菌Rosetta gami B,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting检测分析表明,PoIFN-λ3基因获得表达,重组蛋白大小为32 000,以包涵体形式存在。重组蛋白经变性、纯化、复性后,用细胞病变抑制法在MDBK/VSV系统上进行抗病毒活性的测定。结果显示,复性后重组蛋白的含量约为1g/L,抗水泡性口炎病毒(VSV)活性达到2×103 U/mg,表明重组poIFN-λ3具有较高的抗病毒作用。