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表达绿色荧光蛋白猪源植物乳杆菌重组菌株的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 王晶 1 ; 季海峰 1 ; 王四新 1 ; 张董燕 1 ; 刘辉 1 ; 王雅民 1 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

关键词： 植物乳杆菌;绿色荧光蛋白;穿梭表达载体

期刊名称： 中国畜牧杂志

ISSN： 0258-7033

年卷期： 2014 年 50 卷 15 期

页码： 75-79

收录情况： 北大核心

摘要： 为了深入研究益生菌猪源植物乳杆菌的作用机理,构建含有标记基团绿色荧光蛋白的植物乳杆菌重组菌株,以达到良好区分动物内外源菌的目的。以具有红霉素耐药性(Em)和氨苄青霉素耐药性(AmpR)双筛选压力的大肠杆菌——乳酸杆菌穿梭表达载体pLEM415为基本骨架,将绿色荧光蛋白(GFP)及其表达原件乳酸脱氢酶启动子(PldhL)和嗜酸乳杆菌表面蛋白终止子(TslpA)插入该载体,构建GFP标记的穿梭表达载体pLEM415-GFP。利用电转化的方法将穿梭表达载体pLEM415-GFP转化入植物乳杆菌,获得重组植物乳相菌。结果表明:重组菌在蓝光激发下可见明显绿色荧光,连续传递10代仍可见明显荧光。结果显示,已成功构建表达GFP基因的重组植物乳杆菌,为益生菌在动物体内分布和定植规律的研究奠定了基础。

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