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动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 夏兴霞 1 ; 刘洁 1 ; 王永山 1 ; 诸玉梅 1 ; 欧阳伟 1 ; 何孔旺 1 ; 张雪寒 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词: 肠出血性大肠杆菌O157∶H7;单克隆抗体(mAb);生物制剂;人兽共患病

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2009 年 25 卷 02 期

页码: 73-77

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 将E.coliO157∶H7(EHEC-O157∶H7)用甲醛灭活、超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP2/0骨髓瘤细胞融合后,获得7株分泌抗E.coliO157∶H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMλ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×103,腹水效价均为1×1011;C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10~2×102,腹水效价均为1×103。相加ELISA结果显示,F1、G9和G11 3株mAbs对应相同的抗原表位,而其它4株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,7株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Western blotting表明,C3、E7和F1 3株mAbs在蛋白分子量28×103处有特异性条带,而其它4株mAbs则未显示蛋白带。

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