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强力霉素单克隆抗体制备及ciELISA检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 余少梅 1 ; 艾晓辉 2 ; 甘金华 2 ; 刘永涛 2 ; 索纹纹 1 ;

作者机构: 1.华中农业大学水产学院

2.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词: 强力霉素(DC);杂交瘤细胞;单克隆抗体;间接竞争酶联免疫吸附法(ciELISA);水产品;残留检测

期刊名称: 华中农业大学学报

ISSN: 1000-2421

年卷期: 2013 年 32 卷 03 期

页码: 112-117

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以人工合成的强力霉素-牛血清白蛋白(DC-BSA)为抗原免疫BALB/C小鼠,用间接ELISA和间接竞争ELISA法选择细胞融合的备用小鼠;应用杂交瘤技术建立分泌DC McAb的杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备DC McAb,并对DC McAb的免疫学特性进行鉴定;应用DC McAb建立检测DC的ciELISA方法,并对其相关特性进行检测。结果表明:筛选后获得1株分泌特异性抗体的细胞3D1-H4,细胞培养上清效价为1∶(8×102),腹水效价为1∶(5.12×105),抗体为IgG1型免疫球蛋白,与四环素、土霉素和金霉素分别有8.87%、5.86%和2.74%的交叉反应率,与其他抑制物无交叉反应性;ciELISA检测方法的线性范围为1.58~199.53 ng/mL,灵敏度为2.88 ng/mL,半数抑制的质量浓度IC50为36.31 ng/mL,斑点叉尾鮰肌肉和肝脏样品中DC的平均添加回收率分别为85.13%和79.69%,平均批间和批内变异系数均小于15%,不同基质对检测结果影响小。所建立的ciELISA方法可以应用于水产品中DC残留的检测。

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