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RNAi转基因大豆品系‘B5C9123-5’的RPA可视化检测技术

文献类型： 中文期刊

作者： 张晨 1 ; 雷展 1 ; 李凯 1 ; 李飞武 1 ; 商颖 1 ; 许文涛 1 ;

作者机构： 1.昆明理工大学农业与食品学院;中国农业大学食品科学与营养工程学院/北京食品营养与人类健康高精尖创新中心;农业农村部农业转基因生物安全评价(食用)重点实验室;吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

关键词： RNAi转基因作物;重组酶聚合酶扩增;可视化检测;SYBR Green I

期刊名称： 中国农业大学学报

ISSN： 1007-4333

年卷期： 2022 年 01 期

页码： 50-57

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为开发RNAi转基因作物的田间可视化鉴定方法,以DNA嵌合染料SYBR Green I为材料,采用设置重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)特异性引物的手段,建立了一种快速、低成本、可视化的RPA用于转基因大豆‘B5C9123-5’的检测。结果表明,在靶标不存在时,RPA体系中游离的SYBR Green I染料使溶液呈现较弱的黄色荧光。在靶标存在的情况下,RPA扩增产生的双链DNA与SYBR Green I结合导致溶液从黄色转变为绿色并使荧光迅速增强。通过对RPA扩增时间和温度进行优化,阳性结果可在20min内用肉眼鉴别,检测限为1.00ng/μL。通过设置不同RPA引物,该方法可用于现场快速检测多种RNAi转基因作物。

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