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β-1,4-葡聚糖内切酶基因在大肠杆菌中分泌表达

文献类型: 中文期刊

作者: 李湘玉 1 ; 刘秦华 2 ; 李君风 2 ; 白晰 2 ; T. Desta 2 ; 王思然 2 ; 董志浩 2 ; 白云峰 2 ; 邵涛 3 ;

作者机构: 1.南京农业大学饲草调制加工与贮藏研究所;江苏省农业科学院循环农业研究中心

2.;南京农业大学饲草调制加工与贮藏研究所;江苏省农业科学院循环农业研究中心

3.;南京农业大学饲草调制加工与贮藏研究所;江苏省农业科学院循环农业研究中心;

关键词: 瑞氏木霉;β-1,4-葡聚糖内切酶;大肠杆菌;分泌表达

期刊名称: 食品与生物技术学报

ISSN: 1673-1689

年卷期: 2018 年 03 期

页码: 309-315

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用重叠延伸PCR合成技术将乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)分泌蛋白基因序列usp45(81 bp)和瑞氏木霉(Trichoderma reesei)β-1,4-葡聚糖内切酶成熟蛋白序列egl3(657 bp)连接成融合基因usp45-egl3,构建了分泌型重组质粒pMG36e-usp45-egl3及重组大肠杆菌E.coli DH5α/pMG36e-usp45-egl3。分析重组大肠杆菌的表达效果及表达产物降解纤维素的能力。结果表明,重组大肠杆菌DH5α/pMG36e-usp45-egl3经14 h培养能分泌酶活为226 mU/mL的β-1,4-葡聚糖内切酶,并有效地降解了羧甲基纤维素钠。其中分泌的β-1,4-葡聚糖内切酶降解羧甲基纤维素钠生成还原糖的速率为2.35 mg/(h·mL)。

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