文献类型: 中文期刊
作者: 王永山 1 ; 王永强 1 ; 王笑梅 1 ; 朱向东 1 ; 毕振威 1 ; 范红结 1 ;
作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;南京农业大学动物医学院
关键词: 传染性法氏囊病病毒(IBDV);microRNA(miRNA);基因芯片;荧光定量PCR
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2012 年 32 卷 03 期
页码: 329-336
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用,用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡,24h后,取感染CEF和法氏囊组织,提取细胞总RNA,用Hy3/Hy5双色荧光标记,与miRNA芯片杂交,进行芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示:在IBDV弱毒感染的CEF中,有17个细胞内源性miRNA表达上调,17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中,有30个细胞内源性miRNA表达上调,18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物,用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果,2种方法的检测结果一致。结果表明,IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化,这些上调或下调的miRNA能调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常,引起细胞及组织器官发生病理学变化。
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